研究报告

葡萄实时荧光定量 PCR 稳定内参基因的筛选和验证  

任芳 , 张尊平 , 范旭东 , 胡国君 , 李晨 , 董雅凤
中国农业科学院果树研究所, 国家落叶果树脱毒中心, 兴城, 125100
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17 卷, 第 25 篇   
收稿日期: 2019年07月05日    接受日期: 2019年08月13日    发表日期: 2020年02月12日
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摘要

选择稳定的内参基因是实时荧光定量 PCR (real-time fluorescence quantitative PCR, qPCR)分析的重要条件。本研究采用不同品种、季节和组织部位葡萄样品为研究材料,利用 qPCR 测定了 19 个候选内参基因相对表达量,并采用 GeNormNormFinder BestKeeper 3 个软件对候选内参基因表达稳定性进行分析评价。3 个软件分析结果表明,表达最稳定的 3 个内参基因均为 GAPDHUBQ-1 EF1琢-1。为验证内参基因稳定性,以筛选出的 GAPDHUBQ-1 EF1琢-1 为内参,对感染葡萄病毒 E (Grapevine virus E, GVE)的不同部位葡萄样品中 GVE 相对表达量进行 qPCR 分析。结果表明,GAPDHUBQ-1 EF1琢-1 分别单独作内参和3个基因组合作为内参进行相对定量时,GVE 在植株不同部位样品中的相对表达量变化趋势基本一致,表明这 3个内参基因在葡萄不同组织部位中稳定表达,适合作为葡萄 qPCR 分析的内参基因。

关键词
葡萄;内参基因;实时荧光定量 PCR

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《分子植物育种》印刷版
• 第 17 卷
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